Techniki immunocytochemiczne i hybrydyzacji in situ na poziomie mikroskopu elektronowego


Ramowy program kursu

Kurs jest kierowany do osób, które chcą we własnej pracy laboratoryjnej bądź dydaktycznej wykorzystać informacje dotyczące technik immunocytchemicznych i hybrydyzacji in situ. Główną ideą kursu jest zapoznanie uczestników z praktycznymi aspektami technik lokalizacji molekuł in situ na poziomie mikroskopu elektronowego oraz ich wykorzystaniem we własnej pracy naukowej. Kurs jest również kierowany do studentów, którzy chcą rozszerzyć swoje umiejętności i nabyć nowe kwalifikacje (uczestnicy kursu będą otrzymywać dyplomy). Ostatni etap kursu będzie dotyczył interpretacji w tym oceny uzyskanych obrazów po zastosowaniu powyższych technik. W trakcie kursu prowadzący będą starali się odpowiedzieć i pomóc rozwiązać indywidualne problemy uczestników kursu związane z techniką mikroskopii elektronowej.
 
Szczegółowy program kursu:
 

28/09/2009

Od godziny 9.30 będzie można odebrać materiały kursowe oraz napić się kawy  

 

10.00 Otwarcie kursu

10.15  prof. dr hab. Elżbieta Bednarska – Jak metodami mikroskopii elektronowej badamy architekturę jądra komórek roślinnych - wykład.

10.45 dr Janusz Niedojadło - Wprowadzenie do mikroskopii elektronowej. Przygotowanie materiału do technik immunocytchemicznych i hybrydyzacji in situ-wykład.

11.30 Przerwa kawowa

12.00 dr Marta Lenartowska - Porównanie technik immunocytchemicznych stosowanych na poziomie mikroskopu świetlnego i elektronowego (lokalizacja antygenu przed i po zatopieniu materiału) -wykład. 

12.45  dr Dariusz J. Smoliński - In situ hybrydyzacja – metoda detekcji kwasów nukleinowych w mikroskopii świetlnej i elektronowej-wykład.

13.30 Przerwa obiadowa

15.00 Zajęcia laboratoryjne

18.45 Przewidywane zakończenia zajęć

 

 

29/09/2009

 

9.00 Zajęcia laboratoryjne

14.00 Przerwa obiadowa

15.30 Zajęcia laboratoryjne

18.00 Przewidywane zakończenie zajęć

 

Przerwy kawowe będą odbywały się w poszczególnych grupach w trakcie wolnego czasu wynikającego z protokołu technik

 

30/09/2009

 

9.00 dr Bohdan Paterczyk - Właściwości QDots i ich zastosowanie w mikroskopii optycznej i

elektronowej

9.45   Obserwacja otrzymanych wyników w mikroskopie elektronowym (grupy ok. 5 osobowe po 40 min)

11.45 Podsumowanie technik immunocytochemicznych stosowanych przed i po zatopieniu materiału

12.45 Obserwacja otrzymanych wyników w mikroskopie elektronowym (grupy ok. 5 osobowe po 40 min)

14.45 Planowane zakończenie kursu

 
 
 
 
Zajęcia laboratoryjne:
1)       Lokalizacja aktyny z zastosowaniem koloidalnego złota i wzmacniacza srebrowego przed zatopieniem materiału
2)       Immunozłotowa lokalizacja antygenów jądrowych (np.: snRNA, antygenu PANA) prowadzona po zatopieniu materiału
3)       Lokalizacja U2snRNA i/lub rRNA z zastosowaniem techniki hybrydyzacji in situ
Uczestnicy kursu będą pracować w parach, będą brali udział we wszystkich trzech typach technik laboratoryjnych. Materiał ćwiczeniowy będą stanowić komórki somatyczne i generatywne roślin oraz zwierząt.